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本生人胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫試劑盒

簡要描述:本生人胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫試劑盒本生生物公司供應:ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。

  • 產品型號:
  • 產       地:天津市
  • 更新時間:2023-02-14
  • 訪  問  量:588
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  本生人胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫試劑盒


  僅供研究使用。

  檢測范圍: 96T3 ng/L -120 ng/L

  使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中胎盤生長因子(PLGF)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人胎盤生長因子(PLGF)水平。用純化的人胎盤生長因子(PLGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胎盤生長因子(PLGF),再與HRP標記的胎盤生長因子(PLGF)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胎盤生長因子(PLGF)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人胎盤生長因子(PLGF)濃度。

  試劑盒組成

  130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液

  6ml×1瓶2酶標試劑

  6ml×1瓶8標準品(1600μg/mL)

  0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液

  1.5ml×1瓶4樣品稀釋液

  6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液

  6ml×1瓶11封板膜2張 6顯色劑B液

  6ml×1/瓶12密封袋1個

  標本要求

  1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡s快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

  2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

  操作步驟

  1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。800μg/mL5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液400μg/mL4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液200μg/mL3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液100μg/mL2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液50μg/mL1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

  2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

  3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

  4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

  5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

  6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

  7.溫育:操作同3。

  8.洗滌:操作同5。

  9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

  10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

  11.測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

  操作程序總結:

操作程序總結:.png

  計算 以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

  本生人胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫試劑盒 注意事項

  1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

  2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

  3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

  4.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物請避光保存。

  7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

  8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

  9.本試劑不同批號組分不得混用。

  保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.

  有效期:6個月

 


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