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豬游離血紅蛋白(F-Hb)ELISA試劑盒

簡要描述:豬游離血紅蛋白(F-Hb)ELISA試劑盒本生生物公司供應:ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。

  • 產品型號:
  • 產       地:天津市
  • 更新時間:2023-06-05
  • 訪  問  量:537
詳細介紹
品牌其他品牌產地國產
級別其他規格48T/96T

  豬游離血紅蛋白(F-Hb)ELISA試劑盒技術說明

 

  檢測范圍:0.6μg/ml -22μg/ml

  96T

  使用目的: 豬游離血紅蛋白(F-Hb) ELISA試劑盒用于測定豬全血樣本中游離血紅蛋白(F-Hb)含量。

  實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬游離血紅蛋白(F-Hb)水平。用純化的豬游離血  紅蛋白(F-Hb)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入游離血紅蛋白 (F-Hb),再與 HRP  標記的游離血紅蛋白(F-Hb)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物, 經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP  酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下 轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的游離血紅蛋白(F-Hb)呈正相關。用酶標儀在 450nm  波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中豬游離血紅蛋白(F-Hb)濃度。

組成.png

  標本要求

  1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

  2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

  操作步驟

  1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

    標準品稀釋步驟.png

  2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣  50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5  倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

  3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

  4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

  5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 后棄去,如此重復 5 次,拍干。

  6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。

  7. 溫育:操作同 3。

  8. 洗滌:操作同 5。

  9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 10 分鐘.

  10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

  11. 測定:以空白孔調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。

  豬游離血紅蛋白操作程序總結:

操作程序總結:.png

  計算

  以標準物的濃度為橫坐標,OD  值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的 OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD  值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

  注意事項

  1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

  2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

  3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

  4.  請每次測定的同時做標準曲線,好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值 大于標準品孔一孔的 OD  值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物請避光保存。

  7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

  8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

  9.本試劑不同批號組分不得混用。

  保存條件及有效期

  1.試劑盒保存:;2-8℃。

  2.有效期:6 個月

  豬游離血紅蛋白(F-Hb)ELISA試劑盒本生一直視質量控制為企業的生命,追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業精神作為標準,以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創美好的未來。

 


 


 


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